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色谱Tips|移液器的使用和校准方法 

发布时间:2021/06/10

移液器的使用方法


01设定移液体积

从大量程调节至小量程为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可;从小量程调节至大量程时,应先调至超过设定体积刻度,再回调至设定体积,这样可以保证移液器的精确度。


02装配移液枪头

将移液枪垂直插入吸头,左右旋转半圈,上紧即可。


03垂直吸液

吸头尖端浸入液面3mm以下,吸液前枪头先在液体中预润洗2~3次确保移液的精度和准度(因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。)。

使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常。


04放液

如果量很小则应将吸头尖端靠在容器内壁。

慢吸慢放,以防突然松开溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。



image.png



移液器注意事项


1.浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。

2.可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20℃时重0.9982g。

3.移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。

4.移液器未装吸头时,切莫移液。

5.在设置量程时,不要将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液器。

6.移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如,浓酸、浓碱、有机物等)。

7.不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。

8.如长时间不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧;

9.定期清洁移液器外壁,可以用95%酒精或60%的异丙醇,再用蒸馏水擦拭,自然晾干;如果消毒可以用紫外照,或者用75%酒精擦拭;或使用可高压灭菌的移液器。

image.png

移液器容量允许误差和测量重复性


标称容

量/μL

校准点

/μL

容量允许

误差±(%)

测量重复

性≤(%)

20

2

12.0

6.0

10

8.0

4.0

20

4.0

2.0

50

5

8.0

4.0

25

4.0

2.0

50

3.0

1.5

100

10

8.0

4.0

50

3.0

1.5

100

2.0

1.0

200

20

4.0

2.0

100

2.0

1.0

200

1.5

1.0

1000

100

2.0

1.0

500

1.0

1.0

1000

1.0

0.5

5000

500

1.0

0.5

2500

0.5

0.2

5000

0.6

0.2



移液器快速校准的方法


使用设备及物品:电子天平(测量范围200g;分度值0.1mg);烧杯(50mL)1个;烧杯(100mL)1个;定性滤纸若干小块;超纯水80mL;

1.打开电子天平,空载调零;

2.放入小烧杯待天平显示稳定后,按下归零键归零。给移液器上安装相应的吸液嘴,对移液器的枪头进行预洗;

3.将移液器的容量调至被检点。被检点一般选择最小,中间和最大容量值。可以是某一指定的容量点;

4.使用移液器移取被检容量的超纯水至天平的小烧杯内;

5.待天平显示稳定后,马上读取并记录此时电子天平显示出的数值。记录完毕将电子天平复零;

6.重复5次执行3-5条。记录完毕,将移液器的容量调至下一被检点继续。被检点遵循从小到大的原则进行调整;



移液器的评价标准


对照上表1的移液器容量允许误差和测量重复性


移液器的修正方法


1.将移液器调整至最小量程,按照校准方法得到当前的实际容量值,根据与标示容量值的差值,通过移液器上的调准旋钮进行调整;
2.当调整后测得的实际容量值与标示容量值符合表1要求时,将移液器容量调整至中间量程继续测量。中间量程符合要求时,再调整至最大量程继续测量。
3.如果中间量程或者最大量程有一个不符合表1要求时,则需重新调整至最小量程继续修正。直到3个量程的值都符合表1要求为止。
4.修正完毕的移液器,需重新进行校准。
5.最小量程低于10μL的,不进行修正。如果最大量程和中间量程符合校准要求的,继续使用,否则返厂维修。